近些年來，生物醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展迅速，細(xì)胞治療、抗體藥物治療成為研究熱門。隨之而來生物制品安全控制，成為相關(guān)從業(yè)者關(guān)注的焦點。

支原體因其隱蔽性高、分布廣泛的特點，一直以來，在檢測方面存在著困難。但對于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的生物制品等工藝過程，支原體檢測勢在必行。各國藥典中，都對相關(guān)生物制品的支原體檢測做出了規(guī)定。本期內(nèi)容，我們就來詳細(xì)講講，《歐洲藥典》中支原體檢測方法——培養(yǎng)法。

《歐洲藥典》中，對于培養(yǎng)法有許多限制與規(guī)定，總結(jié)為如下幾點：

1、確保在所選擇的培養(yǎng)條件下可能存在于待檢測產(chǎn)品中的少量支原體生長

2、液體介質(zhì)必須含有酚紅。

3、所選擇的培養(yǎng)基范圍至少能滿足以下幾種微生物生長的營養(yǎng)需求，即滿足測試菌株的生長條件，對每一批新培養(yǎng)基進(jìn)行營養(yǎng)特性測試。

培養(yǎng)條件如下：

液體培養(yǎng)：在35-38°C的密封容器中培養(yǎng)。

固體培養(yǎng)：在35-38°C的微親氧條件下(含5- 10%二氧化碳的氮氣和足夠的濕度以防止瓊脂表面干燥)培養(yǎng)。

《歐洲藥典》中規(guī)定，支原體培養(yǎng)法檢測，所用的需要進(jìn)行營養(yǎng)特性實驗（特異性驗證）、抑制物質(zhì)實驗（耐用性）的驗證，才有說服力。

另外，待檢測的樣品也需要進(jìn)行一定處理。

從實驗原理看，培養(yǎng)法檢測支原體有以下特點：

優(yōu)點：靈敏度高

缺點：只能檢測活的支原體

藥典中提到，經(jīng)過驗證，NAT法可以替代培養(yǎng)法進(jìn)行支原體檢測。

德國MB的支原體qPCR檢測試劑盒：Venor®Gem qEP，通過《歐洲藥典》方法學(xué)驗證，涵蓋培養(yǎng)法的同時，規(guī)避其短板。